方法從百里香等5種植物精油中篩選出對(duì)灰霉等4種微生物具有強(qiáng)抑制作用的精油，并對(duì)其成分進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）分析。將篩選出的精油結(jié)合聚乙烯醇涂布于紙張表面制得抗菌紙，采用熏蒸法測(cè)試其對(duì)供試微生物的抑制作用，并研究其對(duì)草莓的保鮮效果。結(jié)果百里香精油和丁香羅勒精油對(duì)4種供試微生物的抑菌效果。百里香精油的主要成分為百里香酚和香芹酚，其峰面積百分比分別為77.04%和16.46%；

丁香羅勒精油的主要成分為丁香酚和β-石竹烯，其峰面積百分比分別為77.95%和18.80%。涂布液中精油體積分?jǐn)?shù)為4%的抗菌紙（雙層涂布，下同）抑菌效果。精油體積分?jǐn)?shù)為3%的抗菌紙抑菌效果次之，但其對(duì)維持草莓感官品質(zhì)、抑制草莓的腐爛、延緩其菌落總數(shù)上升的效果，顯著優(yōu)于精油體積分?jǐn)?shù)為4%，2%和1%的抗菌紙及原紙（P<0.05）。抗菌紙對(duì)草莓可溶性固形物含量無(wú)明顯影響。1  實(shí)驗(yàn) 1.1  材料和儀器 主要材料：地錦草精油、山蒼子精油、生姜精油、百里香精油、丁香羅勒精油，吉安市青原區(qū)綠源天然香料油廠；交鏈孢、灰霉、根霉、青霉，天津科技大學(xué)菌種保藏中心；聚乙烯醇，司；草莓，采購(gòu)于天津某農(nóng)場(chǎng)，挑選外觀、品質(zhì)、大小相近，約九成熟的草莓用于保鮮實(shí)驗(yàn)；聚乙烯（PE）保鮮膜，厚度為（10±1）μm，耐熱溫度為120 °C，耐冷溫度為−55 °C，氧氣透過(guò)率為10 150~24 850 cm3/(m2·d·atm)，二氧化碳透過(guò)率為77   720~190   280   cm3/(m2·d·atm)，透濕量為17.4~42.6 g/(m2·d)，其中1 atm=101.325 kPa。

首先將滅菌后的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA培養(yǎng)基）在無(wú)菌操作臺(tái)中倒入直徑為90 mm的無(wú)菌平皿中，待培養(yǎng)基冷卻后倒入100 mL的菌懸液（孢子濃度調(diào)整為約1×107  CFU/mL，無(wú)菌三角玻璃棒抹勻），隨后在涂布菌懸液的培養(yǎng)基上放置一個(gè)直徑為6  mm的無(wú)菌濾紙片，在濾紙片上添加10 μL精油，以添加10 μL的無(wú)菌生理鹽水為空白對(duì)照，于28 °C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48  h，采用全自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)系統(tǒng)測(cè)試抑菌圈直徑。

1.3精油成分GC-MS分析 采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）對(duì)百里香和丁香羅勒精油進(jìn)行成分分析，參考張文靜[8]的方法進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，氣相色譜主要參數(shù)如下：采用DB-5色譜柱（規(guī)格為30 m×0.25 mm×0.25 μm），氣相色譜儀進(jìn)樣口溫度為250 °C，分流比為201∶；載氣為He；初始柱溫為60 °C（保持3  min），程序升溫的速率為8 °C/min，升至250 °C并保持10  min。質(zhì)譜主要運(yùn)行參數(shù)如下：離子源溫度為220 °C，傳輸線溫度為220 °C，質(zhì)荷比掃描范圍為43~500。將精油稀釋1000倍，取0.4 μL進(jìn)樣，通過(guò)檢索NIST10質(zhì)譜庫(kù)并結(jié)合參考文獻(xiàn)[9—10]進(jìn)行比對(duì)分析，鑒定出各精油成分。采用面積歸一法計(jì)算各成分的峰面積百分含量。

1.4  涂布抗菌紙的制備 參照Moghimi[11]的方法并作出適當(dāng)修改。百里香精油和丁香羅勒精油按體積比為11∶進(jìn)行復(fù)配，將復(fù)配精油（體積分?jǐn)?shù)分別為1%，2%，3%，4%）、吐溫-80（與加入精油量相同）、大豆卵磷脂（質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.001%）按比例加入400 mL蒸餾水中，攪拌均勻后超聲處理60  min（超聲功率為800  W），隨后加入聚乙烯醇（質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%），使用勻漿機(jī)勻漿5 min。

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